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| 目的探讨哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）中肌浆/内质网Ca2+-ATP酶（SERCA2）的表达对IL-8分泌的影响。方法建立卵清蛋白（OVA）诱导的哮喘大鼠模型，分离原代ASMCs，分别用qRT-PCR及Westernblotting、FuraPE-3/AM和ELISA法检测各组ASMCs中SERCA2表达、细胞内Ca2+浓度（[Ca2+]i）和IL-8，利用siRNA技术下调SERCA2、毒胡萝卜素（TSG）抑制SERCA2以及吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）抑制NF-资B活化，检测不同状态下IL-8的变化。结果与正常组比较，哮喘组SERCA2的表达减少，经缓激肽（BK）刺激的钙瞬变峰值明显下降，需更长时间重新摄取钙使[Ca2+]i恢复至基线水平，IL-8基础值和经IL-17刺激后的诱导值均增加（P＜0.05或0.01）。无论有无IL-17刺激，基因下调组IL-8mRNA表达和分泌均显著增加（均P＜0.01），与哮喘对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。哮喘组I资B琢磷酸化和NF-资Bp65核转位均较正常组增加（P＜0.05或0.01），基因下调组和TSG抑制组的NF-资Bp65核转位亦增加（P＜0.05或0.01），而使用PDTC后，基因下调组、哮喘对照组和正常对照组在IL-17刺激诱导下的IL-8mRNA表达和分泌均减少（P＜0.05或0.01）。结论哮喘大鼠ASMCs中SERCA2表达减少，导致钙稳态的改变，可能通过增强NF-资B活化来介导IL-8分泌亢进。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2019.40.11.2017-2256 |
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| 基金项目:杭州市卫生科技计划（一般）项目（2015A06） |
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