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| 目的探讨RNA干扰（RNAi）技术下调肝脏和骨骼肌细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS3）表达对2型糖尿病（T2DM）大鼠糖代谢的影响。方法构建并筛选SOCS3短发夹状RNA（shRNA）表达质粒，与慢病毒包装质粒共转染293T细胞，包装产生慢病毒。制备T2DM大鼠模型，采用随机数字表法分为对照组和干扰组各15只，于实验第1天和第15天对照组尾静脉注射非干扰序列慢病毒1.5ml/次，干扰组尾静脉注射SOCS3RNAi慢病毒1.5ml/次。4周后检测大鼠空腹胰岛素（FINS）和空腹血糖（FPG）水平，计算胰岛素抵抗指数（IRI）和胰岛素敏感指数（ISI）；实时荧光定量PCR法和Westernblot法检测大鼠肝脏和骨骼肌组织中SOCS3mRNA和蛋白表达水平。结果成功构建了SOCS3shRNA慢病毒表达质粒，其在C6大鼠神经胶质瘤细胞中可抑制SOCS3表达，其抑制率为70%，获得的慢病毒滴度为1.0×109TU/ml。干扰组肝脏和骨骼肌组织中SOCS3mRNA和蛋白表达水平较对照组均明显下降，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。干扰组FINS、FPG和IRI较对照组均明显下降，而ISI较对照组明显上升，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论利用RNAi技术下调T2DM大鼠SOCS3基因可提高T2DM大鼠胰岛素敏感性，缓解胰岛素抵抗程度。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2018.40.17.2017-2774 |
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| 基金项目:浙江省公益性技术应用研究计划项目（2013C37028） |
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