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| 目的探讨甲状腺转录因子（TTF-1）对肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）药物敏感性及细胞上皮间质化的影响。方法将培养后的肺腺癌HCC827细胞分为空载体组、阴性质粒转染（NC-shRNA）组和阳性质粒转染（TTF-1-shRNA）组，通过shRNA干扰技术抑制细胞中的TTF-1基因表达，用流式细胞仪测定转染前后细胞凋亡率和细胞周期变化。不同浓度的吉非替尼（10、20、40、60滋mol/ml）作用各组细胞72h，CCK-8法检测细胞生长抑制率。5ng/ml转化生长因子-β1（TGF-β1）作用各组细胞48h，细胞出现上皮间质化，Westernblot法测定TTF-1、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达。结果与NC-shRNA组、空载体组比较，TTF-1-shRNA组细胞凋亡率明显增加，G0/G1相百分比升高，S相和G2/M相百分比降低（均P＜0.05）；不同浓度吉非替尼作用后，每组细胞的生长抑制率均随药物浓度的增加而升高，不同浓度比较差异有统计学意义（P＜0.05）。同一浓度时，3组细胞生长抑制率之间的差异有统计学意义（P＜0.05）；TTF-1-shRNA组较NC-shRNA组、空载体组均明显为高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；而空载体组与NC-shRNA组比较，仅在吉非替尼20滋mol/ml差异有统计学意义（P＜0.05）。TGF-β1作用前后，与空载体组和NC-shRNA组比较，TTF-1-shRNA组细胞TTF-1、α-SMA蛋白表达水平均为低，E-cadherin蛋白表达水平均为高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与TGF-β1作用前比较，TGF-β1作用后NC-shRNA组和空载体组TTF-1蛋白表达水平均下降，E-cadherin蛋白表达水平均下降，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与NC-shRNA组、空载体组比较，TTF-1-shRNA组TGF-β1作用前后细胞E-cadherin、α-SMA蛋白变化不明显，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论shRNA干扰TTF-1基因可增加肺腺癌HCC827细胞对EGFR-TKI药物敏感性，并部分抑制细胞上皮间质化。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2019.41.22.2019-1591 |
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| 基金项目:浙江省自然科学基金（LQ16H270005）；浙江省中医药管理局科研基金（2015ZB042） |
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