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| 目的探讨沉默GOLPH3对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法设计3对靶向GOLPH3的shRNA，通过脂质体介导的方法转染人胃癌BGC-823细胞，采用qRT-PCR和Westernblot检测BGC-823细胞转染前后GOLPH3mRNA和蛋白表达水平的变化，划痕实验和侵袭实验法检测细胞迁移和侵袭能力的变化，qRT-PCR检测细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9mRNA的表达水平，明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。结果与转染无关序列质粒的NC-shRNA组比较，GOLPH3-shRNA1、GOLPH3-shRNA2、GOLPH3-shRNA3组GOLPH3mRNA和蛋白表达水平均明显降低（均P＜0.05）；与GOLPH3-shRNA1组比较，GOLPH3-shRNA2组、GOLPH3-shRNA3组GOLPH3mRNA和蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）；划痕后24h，GOLPH3-shRNA1组细胞愈合率（13.2±2.0）%，明显低于NC-shRNA组的（40.37±5.37）%（P＜0.05）；GOLPH3-shRNA1组细胞穿过基底膜的细胞数（67.0±7.2）个，明显少于NC-shRNA组（110.0±9.5）个（P＜0.05）；GOLPH3-shRNA1组细胞，MMP-2、MMP-9mRNA表达水平分别为0.49±0.04和0.69±0.04，均低于NC-shRNA组的1.00±0.08和1.00±0.04（均P＜0.05）；与NC-shRNA组相比，GOLPH3-shRNA1组Active-MMP-2、pro-MMP-9活性分别下降44.2%和29.9%（均P＜0.05）。结论沉默胃癌细胞BGC-823中GOLPH3的表达可抑制细胞的迁移和侵袭能力，其机制可能与降低MMP-2、MMP-9的表达及活性有关。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.3.2019-1648 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划（2015KYA047） |
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