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外泌体lncRNA干扰素诱导GTP酶假基因1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
章喜林1, 余欢明, 王翔
湖州师范学院附属第一医院中心实验室
摘要:
目的探讨外泌体长链非编码RNA(lncRNA)干扰素诱导GTP酶假基因1(GVINP1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法收集2016年10月至2018年2月在湖州师范学院附属第一医院经病理组织学确诊为NSCLC的51例患者外周血51份以及健康体检者45例外周血45份;培养人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和NSCLC细胞(A549、H1299),收集选择性培养基;提取血浆外泌体,采用电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;采用RT-PCR法检测GVINP1mRNA表达水平,并分析患者血浆外泌体GVINP1mRNA表达水平与其临床特征之间的关系;利用NSCLC细胞选择性培养基和外泌体处理巨噬细胞(RAW264.7),采用RT-PCR法检测炎症因子mRNA表达水平。结果在电镜下可见NSCLC患者外周血中含有丰富的外泌体,大小为26.7~136.1nm。NSCLC患者和健康体检者血浆外泌体中存在CD9、CD81和Alix蛋白表达;NSCLC患者血浆外泌体GVINP1mRNA表达水平明显高于健康体检者(P<0.05),其中有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的NSCLC患者血浆外泌体GVINP1mRNA表达水平较低(均P<0.05)。与人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)选择性培养基外泌体比较,NSCLC细胞(A549、H1299)选择性培养基外泌体中GVINP1mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05)。与空白对照组(DMEM培养基)相比,BEAS-2B组和NSCLC细胞组选择性培养基中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05),而NSCLC细胞组中IL-10mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与去除外泌体的细胞选择性培养基比较,BEAS-2B和NSCLC细胞选择性培养基外泌体中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05),而NSCLC细胞中IL-10mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论NSCLC可能通过选择性释放携带GVINP1的外泌体进而影响巨噬细胞表型转化,从而促进肿瘤进展,这为NSCLC治疗提供了新的靶点。
关键词:  
DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.19.2019-1845
分类号:
基金项目:国家卫生和计划生育委员会科研基金项目(WKJ-ZJ-1830);浙江省基础公益研究计划(LGF18H160019);湖州市公益性应用研究项目(2017GY33)
Abstract:
Key words: