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| 目的探讨胎盘特异性蛋白-1（PLAC-1）在胎儿生长受限中的表达，以及PLAC-1表达下调后对人胎盘滋养层JEG-3细胞生物学行为的影响，明确PLAC-1在胎儿生长受限中的生物学作用。方法收集20例胎儿生长受限和20例正常对照胎盘组织，免疫印迹法检测PLAC-1在对照组和胎儿生长受限组间表达差异；针对PLAC-1的靶序列合成3条反向互补的寡聚核苷酸序列，采用瞬时转染的方法转染人胎盘滋养层JEG-3细胞，48h后收取细胞，提取总蛋白，免疫印迹法验证siRNA干扰效果。选择敲低效果最佳的siRNA进行细胞表型实验，采用CCK-8、Transwell和细胞划痕等实验方法分别检测细胞增殖、迁移和侵袭情况。结果（1）与对照组胎盘相比，胎儿生长受限组胎盘中PLAC-1蛋白的表达水平明显下调，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）siRNA的敲低效果：3条siRNA均具有PLAC-1的敲低效果，其中siPLAC1-1敲低效果最佳达到90%以上，选择siPLAC1-1进行后续的细胞表型实验。（3）CCK-8检测细胞增殖能力：分别在24、48、72h检测siCtrl和siPLAC-1两组细胞活性，在24h两者差异显著（P＜0.05），48h和72h两者间差异极显著（P＜0.01）。（4）Transwell检测细胞迁移和侵袭能力：在迁移实验中，siPLAC-1组的穿膜细胞数为（67±3）个，明显少于siCtrl组（157±4）个（P＜0.01）；侵袭实验中，siPLAC-1组的穿膜细胞数为（25±5）个，明显少于siCtrl组（84±6）个（P＜0.01）。（5）细胞划痕实验检测细胞迁移：在72h时，siPLAC-1敲低组细胞迁移率为（18.1±2.4）%，对照组为（26.1±3.7）%，细胞迁移差异明显（P＜0.05）。结论PLAC-1在胎儿生长受限胎盘组织明显下调，通过RNAi在JEG-3细胞中干扰PLAC-1表达后，抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力，进而影响胎盘发育异常导致胎儿生长受限的发生。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.4.2019-1960 |
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| 基金项目:浙江省基础公益研究计划（LGF20H040011）；嘉兴市科技计划公益性应用技术研究计划（2017AY33050） |
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