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生物钟基因Bmal1通过氧化应激信号通路调节胰岛茁细胞凋亡的研究
叶绿1, 许伟红, 薛静, 张婷, 朱亮, 杜燕, 吴华香
浙江大学医学院附属第二医院风湿免疫科
摘要:
目的探讨生物钟基因brainandmuscleArnt-likeprotein-1(Bmal1)对胰岛β细胞凋亡的调节作用。方法实验分为正常对照组(含5.5mmol/L葡萄糖,NC组)、高糖组(含33.3mmol/L葡萄糖)、正常糖浓度+无关RNA转染组(含5.5mmol/L葡萄糖,NC+siRNA组)、正常糖浓度+Bmal1基因沉默组(NC+Bmal1-/-组)、高糖+无关RNA转染组(含33.3mmol/L葡萄糖,高糖+siRNA组)、高糖+Bmal1基因沉默组(高糖+Bmal1-/-组)。NC组不加干预因素。采用RNA干扰技术沉默大鼠胰岛茁细胞瘤株(INS-1)Bmal1基因,应用TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,ATP检测试剂盒测定三磷酸腺苷(ATP)含量,实时荧光定量PCR检测Bmal1、去乙酰化酶sirtuin1(Sirt1)mRNA表达情况。结果与NC+siRNA组比较,NC+Bmal1-/-组ATP含量下降,ROS水平增加,Sirt1mRNA表达下降(均P<0.01)。与NC组比较,高糖组ATP下降,ROS增加,Sirt1mRNA表达下降(均P<0.01),细胞凋亡增加(P<0.05)。与高糖+siRNA组比较,高糖+Bmal1-/-组ATP下降,ROS增加,细胞凋亡增加(均P<0.01),Sirt1mRNA表达有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。结论Bmal1可通过调节氧化应激信号通路影响胰岛茁细胞功能和凋亡。
关键词:  
DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2019.41.24.2019-2520
分类号:
基金项目:浙江省自然科学基金(LQ15H070003)
Abstract:
Key words: