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目的探讨头颈部鳞癌顺铂耐药细胞系的建立以及顺铂耐药与Notch1的关系。方法取人头颈部鳞癌细胞系FaDu、UD-SCC-4、UM-SCC-22B,采用顺铂浓度递增、间歇诱导的方法获取头颈部鳞癌顺铂耐药细胞系FaDuDDP-R、UD-SCC-4DDP-R、UM-SCC-22BDDP-R。采用噻唑蓝(MTT)法检测顺铂耐药细胞系的耐药指数,采用Westernblot、qRT-PCR法分别检测并比较原鳞癌细胞系与其耐药细胞系Notch1蛋白及mRNA表达。结果成功建立了3种头颈部鳞癌顺铂耐药细胞系FaDuDDP-R、UD-SCC-4DDP-R和UM-SCC-22BDDP-R,其对顺铂的耐药指数分别为5.72±0.39、7.41±1.19和3.29±0.16。FaDuDDP-R、UD-SCC-4DDP-R的F-Notch1及活化的C-Notch1蛋白表达均高于原鳞癌细胞系;而UM-SCC-22B及其耐药细胞系未见Notch1蛋白表达。UD-SCC-4DDP-R的Notch1mRNA相对表达量明显高于原鳞癌细胞系,差异有统计学意义(P<0.05);而FaDuDDP-R与FaDu、UD-SCC-4DDP-R与UM-SCC-22B的Notch1mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论本研究建立的头颈部鳞癌顺铂耐药细胞系FaDuDDP-R、UD-SCC-4DDP-R和UM-SCC-22BDDP-R具有顺铂耐药的生物学特性,且与Notch1表达有关。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.19.2019-3016 |
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基金项目:浙江省自然科学基金项目(LY14H160012) |
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