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| 目的研究右美托咪定（DEX）对H9C2心肌细胞内质网应激反应（ERS）的影响，探讨可能的发生机制。方法取正常培养的大鼠H9C2细胞，同时进行对照培养和缺氧/复氧（H/R）培养，其中H/R条件为5%CO2和95%N2密闭缺氧装置中缺氧3h后，常氧条件下培养3h。以含有1滋mol/LDEX和1mmol/L4-苯基丁酸（4-PBA）的培养基提前孵育细胞1h和24h。采用低损伤法检测各组细胞上清液的乳酸脱氢酶（LDH）浓度、CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率，以及RT-PCR和Westernblot法检测内质网应激特异性分子葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、Caspase-12的mRNA及蛋白表达情况。将H9C2细胞分设Control组、毒胡萝卜素（TG）组、4-PBA组以及p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂（SB202190）组并进行相应的干预，Westernblot法检测各组p38MAPK和p-p38MAPK的表达，以及GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达情况。结果与Control组相比，H/R组的H9C2细胞活力减低，细胞上清液LDH浓度增加，细胞凋亡率增加（P＜0.05）；与H/R组比较，DEX+H/R组的细胞活力明显增加，细胞上清液LDH浓度明显下降，细胞凋亡率下降（P＜0.05）；与DEX+H/R组比较，4-PBA+DEX+H/R组的H9C2细胞损伤被逆转，GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达也进一步升高。在Control组、TG组和DEX+TG组之间，p38MAPK的表达均无统计学差异，但是TG组的p-p38MAPK表达明显增加，DEX能够抑制p-p38MAPK表达增加（P＜0.05）；与TG组比较，DEX+TG组的GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达被抑制，但是DEX+SB202190+TG组的GRP78、CHOP、Caspase-12mRNA及蛋白表达被逆转增高。结论DEX对H/R损伤下的H9C2心肌细胞具有保护作用，其作用机制与抑制细胞ERS有关，通过调控p38MAPK能够减轻细胞损伤和凋亡。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.21.2020-2171 |
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| 基金项目:浙江省科技厅公益技术应用研究（2017C33185）；浙江省医药卫生科技计划（2019ZD053） |
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