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| 目的探讨miR-328-5p对胃癌细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法将30只小鼠按照随机数字表法分为胃癌组和正常组，每组15只，采用N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）化学诱导法构建小鼠胃癌模型，采用RT-PCR法检测两组小鼠胃组织中miR-328-5p、脊椎蛋白2（SPON2）相对表达量；Westernblot法检测两组小鼠胃组织中酪氨酸蛋白激酶（Src）、磷酸化Src（p-Src）、局部黏着斑激酶（FAK）、磷酸化FAK（p-FAK）蛋白表达水平。将胃癌细胞系SGC7901分为miR-328-5p组、miR-con组、NC组共3组，采用RT-PCR法检测3组细胞miR-328-5p、波形蛋白（Vimentin）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）相对表达量；采用Transwell小室实验检测3组细胞迁移和侵袭数。采用荧光素酶报告基因实验检测胃癌细胞miR-328-5p、miR-con+SPON2基因野生型（WT）和突变型（MUT）的荧光素酶相对活力值。结果与正常组比较，胃癌组胃组织中miR-328-5p相对表达量明显降低，SPON2相对表达量明显升高（均P＜0.05）；与正常组比较，胃癌组胃组织中p-FAK、p-Src蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与NC、miR-con组比较，miR-328-5p组miR-328-5p相对表达量明显升高，同时Vimentin、MMP-9相对表达量均明显降低（均P＜0.05）；与NC、miR-con组比较，miR-328-5p组细胞迁移数和侵袭数均明显降低（均P＜0.05）。与miR-328-5p+SPON2WT组比较，miR-con+SPON2WT组、miR-con+SPON2MUT组、miR-328-5p+SPON2MUT组荧光素酶相对活力值均明显为高（均P＜0.05）。结论miR-328-5p在胃癌组织中呈低表达，过表达miR-328-5p可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力；miR-328-5p直接靶向SPON2基因3'UTR序列，调控其转录表达，并抑制其下游FAK/Src信号活化及其下游Vimentin、MMP-9的表达。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.18.2020-2392 |
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| 基金项目:浙江省教育厅一般科研项目（Y201942728） |
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