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目的探讨[Gly14]-humanin(HNG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞胆固醇外排的作用,进而阐明在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中HNG对腺苷三磷酸结合盒转运体A-1(ABCA-1)和腺苷三磷酸结合盒转运体G-1(ABCG-1)蛋白表达的影响。方法以HUVECs为研究动脉粥样硬化的工具细胞。将对数生长期的HUVECs细胞接种于6孔板中并随机分组,其中采用ox-LDL处理的5组:0滋g/mlox-LDL组、30滋g/mlox-LDL组、60滋g/mlox-LDL组、90滋g/mlox-LDL组、120滋g/mlox-LDL组;采用HNG处理的5组:0nMHNG组、50nMHNG组、100nMHNG组、1滋MHNG组、10滋MHNG组;联合用药处理的5组:空白组、ox-LDL组、ox-LDL+100nMHNG组、ox-LDL+1滋MHNG组、ox-LDL+10滋MHNG组,分别使用不同浓度的HNG预处理HUVECs细胞1h,随之加入60滋g/mlox-LDL;经培养及不同药物作用12h后收集细胞样品。另设HNG作用不同时间5组:0hHNG组、3hHNG组、6hHNG组、12hHNG组、24hHNG组,将1滋M的HNG按上述时间处理细胞后再收集细胞样品。采用Westernblot法检测各组ABCA-1、ABCG-1蛋白的表达水平。结果与0滋g/mlox-LDL组相比,60、90、120滋g/mlox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与0nMHNG组相比,1、10滋MHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与0hHNG组相比,12、24hHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与空白组比较,ox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05);而与ox-LDL组相比,ox-LDL+1滋MHNG组、ox-LDL+10滋MHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。结论HNG通过上调ABCA-1和ABCG-1的蛋白表达而促进胆固醇的外排,可减少内皮细胞脂质的蓄积。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2020.42.21.2020-2483 |
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基金项目:国家自然科学基金(81600988) |
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