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目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对母系表达基因3(MEG3)启动子超甲基化的逆转以及膀胱癌细胞凋亡的作用。方法以不同浓度的5-Aza-CdR(0、2.5、10滋mol/L)作用人膀胱癌T24细胞3d后,采用甲基化特异性PCR检测MEG3启动子甲基化程度,RT-qPCR法检测MEG3mRNA表达,Hoechst33528核染色法和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果MEG3启动子甲基化程度随着5-Aza-CdR浓度增加而下降。0、2.5、10滋mol/L5-Aza-CdR作用T24细胞后MEG3mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、3.17±0.14、6.73±0.57,随着5-Aza-CdR浓度增加而增加(均P<0.05)。在荧光显微镜下,0滋mol/L5-Aza-CdR组T24细胞形态基本正常,2.5、10滋mol/L5-Aza-CdR组T24细胞出现不同程度的凋亡。0、2.5、10滋mol/L5-Aza-CdR作用T24细胞后细胞凋亡率分别为(0.34±0.05)%、(11.49±0.36)%、(17.53±2.03)%,随着5-Aza-CdR浓度增加而升高(均P<0.05)。结论5-Aza-CdR可能通过逆转膀胱癌细胞中MEG3启动子超甲基化状态来恢复MEG3mRNA表达,进而诱发膀胱癌细胞发生凋亡。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2021.43.12.2020-3174 |
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基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2017KY680) |
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