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| 目的观测高温必需因子A4（HtrA4）在子痫前期（PE）孕妇胎盘组织中的表达情况，探讨其与滋养细胞缺氧和缺氧诱导因子-1琢（HIF-1琢）表达的相关性。方法获取基因表达综合（GEO）数据库中PE孕妇胎盘组织芯片数据，分析差异表达基因（DEGs）及HtrA4表达水平。采用Westernblot和qRT-PCR法验证HtrA4在PE孕妇胎盘组织中的表达水平。Bewo滋养细胞经HtrA4小干扰RNA（siRNA）（HtrA4siRNA干扰组）或阴性对照siRNA（阴性对照组）转染后，分别采用MTT法和Transwell法检测细胞增殖和侵袭活性。按1×106个/孔接种细胞，在37℃、20%O2、5%CO2条件下常规培养48h后，分为HIF-1琢激活组、低氧组和对照组。HIF-1琢激活组：采用含200滋MHIF-1琢激活剂氯化钴的细胞培养基，37℃、20%O2、5%CO2继续培养24h；低氧组：37℃、1%O2、5%CO2继续培养24h；对照组：继续常规培养24h。另设立缺氧条件下的HIF-1琢抑制组，即细胞经HIF-1琢siRNA干扰后，按1×106个/孔接种细胞，常规培养48h，再在37℃、1%O2、5%CO2条件下培养24h。分析HtrA4在缺氧条件下表达量及与HIF-1琢表达的相关性。结果共得到13个DEGs。HtrA4在芯片数据和PE孕妇胎盘组织中表达水平均上调（均P＜0.05）。与阴性对照组比较，HtrA4siRNA干扰组侵袭活性下降（P＜0.05），但各组间24、48和72h细胞增殖活性比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与对照组比较，HIF-1琢激活组和低氧组HtrA4和HIF-1α蛋白和mRNA表达水平均上调（均P＜0.05）。与低氧组比较，HIF-1琢抑制组HtrA4和HIF-1琢蛋白和mRNA表达水平均下调（均P＜0.05）。Pearson相关分析发现各组细胞HtrA4与HIF-1琢mRNA表达水平呈正相关（r=0.87，P＜0.01）。结论HtrA4在PE孕妇胎盘组织中表达上调，能促进滋养细胞的侵袭能力，其表达水平与细胞缺氧及HIF-1α表达水平相关，可能在PE发展中起重要作用。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2021.43.5.2020-3882 |
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| 基金项目:浙江省自然科学基金项目（LQ21H040007）；浙江省医药卫生科技计划项目（2019KY666） |
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