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| 目的探讨分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）在卵巢癌发生、发展中的作用及可能的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测不同卵巢癌细胞系（SKOV-3、OVCAR-3、TOV-21G、A2780、OV-1063）中SLPI的表达。利用干扰质粒及过表达质粒构建不同SLPI表达水平的卵巢癌SKOV-3细胞系稳转细胞株，分为shScr组（感染shScr病毒，为敲低对照株）、shSLPI组（感染shSLPI病毒，为SLPI敲低株）、Vector组（感染Vector病毒，为SLPI过表达株对照）、SLPI组（感染SLPI病毒，为SLPI过表达株）。CCK-8法、Transwell小室和流式细胞仪分别检测各组细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡变化；Westernblot法检测各组细胞增殖、凋亡及迁移侵袭相关蛋白表达水平；裸鼠皮下移植瘤实验比较各组细胞皮下移植瘤生长情况。结果与正常卵巢上皮IOSE80细胞相比，各卵巢癌细胞系中SLPImRNA表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与shScr组比较，shSLPI组细胞增殖能力明显减弱，侵袭迁移细胞数目减少，且细胞凋亡率明显升高，体内移植瘤的生长也明显减慢（均P＜0.05）；Westernblot结果显示shSLPI明显降低了增殖相关细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白1（CyclinD1）以及抗凋亡相关B淋巴细胞瘤-2（B-celllymphoma-2,BCL2）蛋白的表达，而促进了促凋亡相关半胱天冬酶3（CleavedCaspase-3）/半胱天冬酶9（CleavedCaspase-9）、BCL2相关X蛋白（BAX）表达；另发现shSLPI组细胞迁移及侵袭相关基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、锌指蛋白SNAIL1（Snail1）和锌指转录因子（Slug）表达明显降低（均P＜0.05）。以上结果在SLPI组与Vector组的比较中得到验证。结论SLPI高表达促进卵巢癌细胞增殖、迁移及抗凋亡能力。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2021.43.9.2020-4518 |
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| 基金项目:温州市基础性医疗卫生科技项目（Y20190397） |
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