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目的探讨优化CD45免疫磁珠阴性筛选法对循环肿瘤细胞(CTC)的富集效率。方法利用SW620细胞和健康供体血液样本模拟CTC,加入SW620细胞数分别为50、75、100个,基于细胞角蛋白和上皮细胞黏附分子双抗体染色的CD45阴性筛选法进行CTC富集。比较常规方案正常剂量与高剂量CD45混合物+免疫磁珠富集SW620细胞的效率,以验证CD45混合物和免疫磁珠是否可以通过结合更多的白细胞和包绕更多的CD45-肿瘤细胞来降低肿瘤细胞富集效率;进一步比较优化方案(对含有贴壁CD45+白细胞的试管再次洗脱和磁场分选)与常规方案富集SW620细胞的效率。结果在常规方案中,正常剂量CD45混合物+免疫磁珠富集SW620细胞的平均效率为65.5%,高于高剂量CD45混合物+免疫磁珠的58.3%。采用优化方案富集SW620细胞的平均效率为82.8%,高于常规方案的61.9%。结论优化CD45免疫磁珠阴性筛选法能提高CTC富集效率。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2021.43.16.2021-1854 |
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基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2017KY251);浙江省卫生健康科技计划项目(2021KY594) |
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