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| 目的探讨茁-连环蛋白（茁-catenin）和Yes相关蛋白（YAP）在Klotho蛋白调节硫酸吲哚酚（IS）诱导巨噬细胞极化中的作用。方法THP-1细胞经丙二醇甲醚醋酸酯处理诱导成THP-1源巨噬细胞，构建Klotho过表达质粒，转染THP-1源巨噬细胞并分为4组。（1）对照组：转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒；（2）对照+IS组：转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒，并予IS（2mmol/L）干预；（3）过表达组：转染构建的Klotho过表达质粒；（4）过表达+IS组：转染Klotho过表达质粒并予IS（2mmol/L）干预。4组细胞采用流式细胞术检测M1极化标志物HLA-DR和M2极化标志物CD206，qRT-PCR法检测茁-catenin和YAPmRNA表达水平，Westernblot法检测β-catenin、YAP和磷酸化YAP（p-YAP）蛋白表达水平，细胞免疫荧光染色法检测茁-catenin、YAP入核率。结果与对照组比较，对照+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显增加（P＜0.01），CD206标记的阳性细胞百分比无明显变化（P＞0.05）；与对照+IS组比较，过表达+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显减少（P＜0.01），而CD206标记的阳性细胞百分比明显增加（P＜0.01）。与对照组比较，对照+IS组茁-cateninmRNA及蛋白表达水平均明显降低，入核率明显下降（均P＜0.01）；而与对照+IS组比较，过表达+IS组茁-cateninmRNA及蛋白表达水平均升高，入核率增加（均P＜0.05）。与对照组比较，对照+IS组YAP蛋白表达水平明显升高，p-YAP蛋白表达水平明显降低，YAP入核率增加（均P＜0.01）；与对照+IS组比较，过表达+IS组YAP蛋白表达水平明显降低（P＜0.01），p-YAP蛋白表达水平升高（P＜0.05）。结论Klotho可通过茁-catenin通路抑制IS诱导的巨噬细胞极化。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.4.2021-2250 |
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| 基金项目:浙江省自然科学基金项目（Y16H150020） |
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