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| 目的探讨二甲双胍通过抑制丙酮酸激酶M2（PKM2）促进线粒体凋亡增强胆管癌细胞对吉西他滨敏感性的作用及机制。方法将二甲双胍及吉西他滨和PKM2激动剂ML265不同组合后作用于人胆管癌细胞HCC9810和RBE：（1）HCC9810/RBE+溶剂组：HCC9810/RBE细胞在含有终浓度5%二甲基亚砜（DMSO）的培养基中培养；（2）HCC9810/RBE+吉西他滨组：HCC9810/RBE细胞在含有终浓度为100nmol/L吉西他滨（溶于5%DMSO）的培养基中培养；（3）HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组：HCC9810/RBE细胞在含有终浓度为10mmol/L二甲双胍和100nmol/L吉西他滨（溶于5%DMSO）的培养基中培养；（4）HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨+ML265组：HCC9810/RBE细胞在含有终浓度为10mmol/L二甲双胍、100nmol/L吉西他滨和100nmol/LML265（溶于5%DMSO）的培养基中培养。48h后采用噻唑蓝染色法检测各组细胞存活率，qRT-PCR法检测各组细胞PKM2mRNA表达水平，乳酸定量检测试剂盒检测各组细胞培养基乳酸含量，乳酸脱氢酶（LDH）定量检测试剂盒检测各组细胞LDH活性；线粒体膜电位检测染色法检测各组细胞线粒体凋亡情况。结果与HCC9810/RBE+溶剂组比较，HCC9810/RBE+吉西他滨组、HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组、HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨+ML265组细胞存活率均降低而线粒体凋亡均增加，HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组、HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨+ML265组细胞培养基乳酸含量、PKM2mRNA表达水平均降低，细胞LDH活性均升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；与HCC9810/RBE+吉西他滨组比较，HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组细胞存活率降低，HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组、HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨+ML265组细胞培养基乳酸含量、PKM2mRNA表达水平均降低而线粒体凋亡均增加、细胞LDH活性均增加，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；与HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨组细胞比较，HCC9810/RBE+二甲双胍+吉西他滨+ML265组细胞存活率、PKM2mRNA表达水平均升高而线粒体凋亡、细胞LDH活性均降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论二甲双胍可能通过抑制胆管癌细胞PKM2的表达、激活线粒体凋亡来增强胆管癌细胞对吉西他滨的敏感性。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.10.2021-3838 |
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| 基金项目:嘉兴市公益性研究计划项目（2018AY32044） |
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