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目的分析胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)在子宫内膜癌(EC)组织、细胞中的表达情况,并探讨GLP1R对EC细胞活力的影响。方法选取2019年至2020年在浙江省立同德医院行手术治疗的EC患者5例,收集EC患者内膜组织和配对的正常内膜组织。购买的5种人EC细胞系分别为HEC-1A、RL95-2、KLE、Ishikawa和AN3CA。分别采用RT-qPCR法、Westernblot法检测EC组织或细胞GLP1RmRNA、蛋白表达水平;采用免疫组化法定性检测EC组织GLP1R蛋白表达情况;采用靶向GLP1R的小干扰RNA(siRNA)转染AN3CA细胞,或用GLP-1类似物exendin-4处理AN3CA细胞,采用CCK-8法检测转染后细胞活力。结果EC组织GLP1RmRNA、蛋白表达水平均高于正常内膜组织(均P<0.05)。免疫组化检测显示,GLP1R蛋白主要在肿瘤细胞膜上表达。5种EC细胞(HEC-1A、RL95-2、KLE、Ishikawa和AN3CA)中,AN3CA细胞GLP1RmRNA、蛋白表达水平高于其他4种细胞(均P<0.05)。转染siRNA的AN3CA细胞GLP1RmRNA表达水平均低于未转染的AN3CA细胞(对照组)(均P<0.05);AN3CA细胞用GLP-1类似物exendin-4处理后,GLP1RmRNA表达水平明显高于对照组细胞(P<0.05)。在培养48、72h时,exendin-4处理的AN3CA细胞存活率高于对照组(P<0.05),转染siRNA后的AN3CA细胞存活率低于转染siNC(阴性对照)的AN3CA细胞(P<0.05)。结论EC组织和细胞中GLP1R表达上调,其表达上调促进EC细胞增殖,加速EC的进展。GLP1R可能在EC细胞中发挥致癌基因功能。GLP1R或可成为EC的生物标志物和治疗EC的生物靶点。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.19.2022-1089 |
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基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2018ZD016);浙江省基础公益研究计划项目(LGF20H160013) |
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