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| 目的探讨微小RNA（miR）-106a对人胶质瘤细胞中腺瘤样息肉（APC）基因的靶向调控作用以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2020年1月至2021年12月浙江省立同德医院减压切除的10例胶质瘤组织和10例对照组织。采用实时荧光定量PCR法检测miR-106a在胶质瘤组织和对照脑组织中、在胶质瘤LN229、U251和U87等细胞系中的表达水平并作比较。使用miR-106a抑制物转染LN229和U251细胞，采用克隆形成实验检测细胞增殖能力，通过流式细胞术检测细胞凋亡水平。通过TOP/FOP荧光素酶实验检测荧光素酶活性，采用Westernblot法检测Wnt通路相关蛋白和核内β-连环蛋白（β-catenin）的表达。采用qRT-PCR和Westernblot法检测APC的mRNA和蛋白表达水平。利用双荧光素酶报告基因实验确认miR-106a和APC的靶向关系。通过表型拯救实验检测miR-106a靶向APC对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果miR-106a在胶质瘤组织和细胞系中高表达。抑制miR-106a表达降低胶质瘤细胞的增殖水平，提高胶质瘤细胞的凋亡水平，并抑制了Wnt/β-catenin信号通路的激活。miR-106a能够靶向APC的3'非编码区，抑制miR-106a后APC的mRNA和蛋白相对表达量均降低。拯救实验结果表明，抑制APC的表达可抵消miR-106a敲低对胶质瘤细胞增殖的抑制作用，并促进细胞凋亡。结论APC是miR-106a的直接靶基因，miR-106a通过靶向APC激活Wnt/β-catenin信号通路调控胶质瘤增殖和凋亡。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2023.4.2022-1424 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目（2020KY503） |
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