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| 目的利用生物信息学方法分析叉头框蛋白O4（FOXO4）在肾透明细胞癌（简称肾癌）中的表达及临床意义。方法Oncomine数据库可视化分析肾癌中FOXO4的表达，UALCAN数据库分析肾癌中FOXO4mRNA和蛋白表达水平。采用CRISPR/dCas9方法使肾癌细胞系FOXO4过表达，RT-qPCR法检测肾癌细胞中FOXO4mRNA表达水平。溴化噻唑蓝四氮唑法检测细胞存活能力。Kaplan-Meierplotter在线数据库分析FOXO4表达与肾癌预后的关系。使用4个在线数据库预测调控FOXO4表达的上游miRNA，通过StarBase数据库分析miRNA在肾癌样本中的表达及其与FOXO4表达的相关性，根据miRNA表达的中位值将肾癌样本分为高表达组和低表达组，分析预后关系。利用双荧光素酶报告基因实验验证它们的靶向调节关系。结果从Oncomine和UALCAN数据库分析得到肾癌样本中FOXO4mRNA和蛋白表达较正常肾组织样本均降低。769-P和786-O肾癌细胞中过表达FOXO4后其细胞存活水平均明显降低。Kaplan-Meierplotter在线数据库分析显示FOXO4低表达组总生存率低于高表达组。hsa-miR-142-3p是FOXO4表达的上游miRNA调控因子，其在肾癌样本中表达上调且与FOXO4表达呈负相关，hsa-miR-142-3p高表达不利于肾癌的预后。双荧光素酶报告基因结果显示hsa-miR-142-3p与FOXO4存在靶向调节关系。结论FOXO4在肾癌中低表达，并与患者不良预后有关，有望成为改善肾癌预后的生物标志物和治疗的靶标。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.21.2022-2154 |
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