| 摘要: |
| 目的探讨低氧环境下甲状腺乳头状癌（PTC）细胞中期因子（Midkine）表达的调节机制。方法以人PTC细胞系BCPAP和TPC1为材料，使用低氧、缺氧诱导因子-1α（HIF1-α）稳定剂DMOG刺激，使用HIF1-α小发夹RNA（HIF1-αshRNA）转染，采用Westernblot法分别检测不同细胞HIF1-α、CD10与半乳糖凝集素3（gal3）蛋白表达的变化。采用双荧光素报告酶法检测HIF1-α与CD10、gal3mRNA的靶向关系，并在公共数据库中检测HIF1-α与CD10、gal3mRNA表达的关联。将BCPAP和TPC1为对照组、CD10的编码基因膜金属肽内切酶（MME）敲低组（转染MMEshRNA）、gal3的编码基因人可溶性半乳糖凝集素3（LGALS3）敲低组（转染LGALS3shRNA）、MME+LGALS3共敲低组（共转染MMEshRNA和LGALS3shRNA），采用Westernblot法检测各组HIF1-α、CD10和gal3蛋白相对表达量，采用ELISA法检测各组Midkine水平。结果低氧、DMOG刺激下，细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均上升（均P＜0.01），且呈时间依赖性。转染HIF1-α后，细胞CD10和gal3蛋白相对表达量均显著下降（均P＜0.01）；双荧光素报告酶实验显示，HIF1-αcDNA与CD10和gal3启动子靶向结合，增强两者的转录表达；HIF1-α与MMEmRNA和LGALS3mRNA表达的相关系数分别为0.43和0.58，均呈正相关（均P＜0.01）。随缺氧时间延长，细胞中Midkine表达水平升高；相比对照组，MME敲低组、LGALS3敲低组和实验组Midkine表达水平显著降低，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论低氧环境下PTC细胞系能够通过HIF1-α调节CD10、gal3的表达，进而调节Midkine表达。 |
| 关键词: |
| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2023.45.9.2022-2806 |
| 分类号: |
| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目（2020KY920） |
|
|
|
|
| Abstract: |
|
| Key words: |
