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目的探究微小RNA(miR)-142-3p对膀胱癌(BC)细胞增殖与有氧糖酵解的影响及作用机制。方法qPCR检测比较人BC细胞系(SW780、UMUC3、T24、BIU87)和人输尿管上皮细胞(SV-HUC-1)中miR-142-3p表达水平,选取低表达的BC细胞进行miR-142-3p过表达质粒转染;分别采用平板细胞克隆实验、CCK8-法、流式细胞术、2-NBDG葡萄糖摄取实验、糖代谢检测试剂盒检测miR-142-3p表达对BC细胞增殖、活性、周期、有氧糖酵解的影响。双荧光素酶和Westernblot法检测miR-142-3p与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、乳酸脱氢酶A(LDHA)的靶向性及作用关系。过表达miR-142-3p的BC细胞分别转染CDK4或LDHA表达质粒,采用CCK8-法、2-NBDG葡萄糖摄取实验、糖代谢检测试剂盒测定转染后的BC细胞活性和有氧糖酵解情况。结果miR-142-3p在T24、UMUC3细胞中显著低表达(均P<0.01)。T24、UMUC3细胞转染过表达miR-142-3p质粒后,克隆能力及活性显著下降(均P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(均P<0.01),2-NBDG荧光强度显著减弱(均P<0.01),葡萄糖消耗量和乳酸生成量显著减少(均P<0.01)。miR-142-3p靶向抑制CDK4和LDHA蛋白表达(均P<0.01)。CDK4或LDHA表达显著逆转了miR-142-3p过表达对T24细胞的活性和有氧糖酵解的抑制作用(均P<0.05)。结论miR-142-3p通过靶向CDK4和LDHA抑制BC细胞增殖和有氧糖酵解。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.17.2022-967 |
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基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2021KY367) |
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