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| 目的探讨雷酚内酯对肺气管上皮细胞上皮间充质转化（EMT）进程的影响。方法首先通过细胞计数试剂盒8法检测雷酚内酯对Beas-2b细胞活性的影响，确定雷酚内酯用药剂量。将细胞分为对照组、模型组、1μmol/L雷酚内酯组和10μmol/L雷酚内酯组。对照组不作任何处理；模型组细胞给予10ng/mLTGF-β1联合10ng/mLTNF-α处理48h；雷酚内酯组细胞在模型基础上，添加终浓度为1μmol/L或10μmol/L雷酚内酯进行共孵育48h。使用相差显微镜观察各组细胞形态变化，免疫荧光实验检测EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和波形蛋白（Vimentin）的表达。通过RT-PCR和Westernblot法检测E-cadherin、α-SMA和VimentinmRNA和蛋白表达水平。进一步通过Westernblot法检测NF-κB通路及EMT相关转录因子Snail家族锌指1（SNAI1）、锌指E-Box绑定同源盒1（ZEB1）和Twist家族BHLH转录因子1（TWIST1）蛋白表达水平。结果1μmol/L和10μmol/L的雷酚内酯能够提高细胞活性，并降低模型组细胞的迁移能力。免疫荧光和Westernblot结果显示，雷酚内酯可抑制由TGF-β联合TNF-α诱导的EMT，与模型组比较，1μmol/L雷酚内酯组和10μmol/L雷酚内酯组α-SMA、Vimentin蛋白荧光强度下调，E-cadherin蛋白荧光强度上调。此外，对EMT相关转录因子的检测结果显示，模型组细胞磷酸化p65、TWIST1、ZEB1、SNAI1蛋白表达水平均上调，而雷酚内酯能够下调以上EMT相关转录因子。结论雷酚内酯可通过抑制NF-κB降低EMT相关转录因子SNAI1、ZEB1和TWIST1的表达，从而抑制由TGF-β联合TNF-α诱导的Beas-2b细胞的EMT进程。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2024.46.2.2023-1060 |
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