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目的研究雷公藤甲素(Tpl)对人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞凋亡的促进作用及可能的分子机制。方法体外培养TNBC细胞株MDA-MB-453细胞并分为4组,对照组正常培养,Tpl低、中、高剂量组分别添加10、20和40nmol/L的Tpl;MDA-MB-453细胞分别转染胎盘特异性8基因(PLAC8)过表达质粒和空载体质粒,添加或不添加20nmol/L处理,分别记作过表达组、过表达+Tpl组、空载组、空载+Tpl组。采用细胞增殖和毒性检验(CCK-8)法检测细胞增殖能力,采用克隆形成实验分析克隆形成能力,采用Transwell实验分析细胞迁移能力;应用流式细胞术检测细胞凋亡情况;利用Westernblot法分析切割型半胱氨酸蛋白酶(Cle-Cas-pase)-3、Cle-Caspase-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PLAC8、Wnt3a及β-连环蛋白(β-catenin)相对表达量。结果与对照组比较,低、中、高剂量组细胞克隆形成率及迁移率均降低,凋亡率均升高,Cle-Caspase-3、Cle-Caspase-9、Bax蛋白相对表达量均升高,Bcl-2、Wnt3a、β-catenin、PLAC8蛋白相对表达量均下降(均P<0.05)。与空载组比较,空载+Tpl组的上述指标表达趋势一致,过表达组上述指标表达均相反(均P<0.05)。与过表达组比较,过表达+Tpl组各指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论Tpl能促进MDA-MB-453细胞株凋亡,该机制可能与PLAC8介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。 |
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DOI:10.12056/j.issn.1006-2785.2023.24.24.2023-1435 |
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基金项目:金华市中医药科学技术研究计划项目(2023KY03) |
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