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| 目的 探讨肥胖诱导脂肪细胞外泌体微小 RNA（miR）-138-5p 对 β 细胞功能的调控作用及其机制。 方法 将
3T3-L1 细胞分为 3T3-L1 组、棕榈酸（PA）+3T3-L1 组；将 MIN6 细胞分为 3T3-L1 外泌体组和 PA+3T3-L1 外泌体组。转染后将
MIN6 细胞分为抑制剂对照物（NC-inhibitor）组、miR-138-5p 抑制剂（miR-138-5p inhibitor）组、miR-138-5p inhibitor +干扰对
照物（siNC）组和 miR-138-5p inhibitor + NeuroD1 表达干扰（siNeuroD1）组。3T3-L1 组细胞使用地塞米松、3-异丁基-1-甲基
黄嘌呤和胰岛素诱导为脂肪细胞；PA+3T3-L1 组细胞在诱导成功后使用 PA 溶液诱导分化。3T3-L1 外泌体组和 PA+3T3-L1 外
泌体组 MIN6 细胞分别与从 3T3-L1 和 PA+3T3-L1 组细胞中分离的外泌体共培养。将 miR-138-5p inhibitor、NC-inhibitor、siNeuroD1 及 siNC 转染至 3T3-L1 细胞或 MIN6 细胞中，提取外泌体并进行共培养，获得 NC-inhibitor 组、miR-138-5p inhibitor 组、
miR-138-5p inhibitor + siNC 组和 miR-138-5p inhibitor + siNeuroD1 组 MIN6 细胞。采用透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分析
进行脂肪细胞外泌体鉴定；采用蛋白质印迹法检测外泌体中 CD81、CD63 的蛋白表达及 MIN6 细胞中 NeuroD1 的蛋白表达；通过
实时定量聚合酶链反应检测 miR-138-5p、胰岛素 1（Ins1）和胰岛素 2（Ins2）的相对表达水平；采用酶联免疫吸附试验检测 MIN6
细胞的胰岛素水平；采用葡萄糖耐量试验评估 MIN6 细胞功能。 结果 油红O 染色和甘油三酯检测显示脂肪细胞诱导成功，体外
细胞肥胖模型构建成功。从脂肪细胞 3T3-L1 中分离出的外泌体表现出典型的外泌体形态和大小，且 CD63 和 CD81 呈阳性。与
3T3-L1 外泌体组比较，PA+3T3-L1 外泌体组 MIN6 细胞中 Ins1 和 Ins2 表达水平均下降（均 P＜0.05），胰岛素水平下降（P＜
0.05）。与3T3-L1 外泌体组相比，PA+3T3-L1 外泌体组外泌体和MIN6细胞中miR-138-5p表达水平均上升（均P＜0.05），MIN6
细胞中 NeuroD1 蛋白表达水平下降。与 NC-inhibitor 组相比，miR-138-5p inhibitor 组的 miR-138-5p 表达水平降低（P＜0.05），
而 NeuroD1 蛋白表达、Ins1 和 Ins2 的 mRNA 表达、胰岛素水平均升高（均 P＜0.05）。与 miR-138-5p inhibitor +siNC 组相比，
miR-138-5p inhibitor +siNeuroD1 组的 NeuroD1 蛋白表达、Ins1 和 Ins2 的 mRNA 表达、胰岛素水平均降低（均 P＜0.05）。 结论
肥胖诱导脂肪细胞外泌体中miR-138-5p表达上调，进而通过NeuroD1损害β细胞功能。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2025.47.9.2023-1491 |
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| 基金项目:宁波市自然科学基金项目（2021J297） |
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