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| 目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）MMP12-001在胆囊癌（GBC）细胞中的表达及对GBC细胞生物学行为的影响。方法采用qRT-PCR法检测lncRNAMMP12-001在GBC癌组织、癌旁组织、GBC细胞株及胆囊上皮细胞中的相对表达量。采用RNA核质分离实验确定lncRNAMMP12-001的亚细胞定位。构建特异性靶向lncRNAMMP12-001的沉默序列及过表达慢病毒载体，分别转染多株GBC细胞株。通过细胞存活率检测、克隆形成实验分析细胞增殖能力的变化。采用Transwell实验观察细胞迁移、侵袭能力的变化。通过RNA互作蛋白拉下实验结合蛋白质谱、RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP）方法筛选lncRNAMMP12-001在GBC中的相互作用蛋白。结果qRT-PCR结果显示癌组织及GBC细胞株中lncRNAMMP12-001相对表达量显著高于癌旁组织和胆囊上皮细胞。RNA核质分离实验发现lncRNAMMP12-001主要位于细胞质内。过表达lncRNAMMP12-001明显促进GBC细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。沉默lncRNAMMP12-001表达则导致相反的结果（均P＜0.05）。RNA互作蛋白拉下实验结合蛋白质谱鉴定结果显示lncRNAMMP12-001在GBC中可与去乙酰化酶沉默调节蛋白3（SIRT3）直接结合。SIRT3RIP实验也发现SIRT3能够富集lncRNAMMP12-001。结论lncRNAMMP12-001能够促进胆囊癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2024.46.14.2023-2131 |
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| 基金项目:湖州市科技局公益性应用研究项目（2022GY17） |
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