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| 目的结合网络药理学及实验探究益癸方汤防治绝经后骨质疏松症的作用及机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台等数据库搜索方剂中主要成分及靶点，利用GeneCard、Drugbank筛选疾病靶点，再使用Cytoscape3.7.1进行药物-疾病靶点网格的构建，最后进行基因本体论及京都基因与基因组百科全书分析。采用随机数字表法将25只大鼠分为假手术组、模型组、益癸方汤组、戊酸雌二醇组、益癸方汤+戊酸雌二醇组，每组5只。除假手术组以外，其余组采用去卵巢手术法造模。术后1个月开始给药，益癸方汤组给予10mL/（kg·d）益癸方汤灌胃，戊酸雌二醇组给予0.21mg/（kg·d）戊酸雌二醇灌胃，益癸方汤+戊酸雌二醇组给予益癸方汤10mL/（kg·d）+戊酸雌二醇0.21mg/（kg·d）灌胃，模型组及假手术组给予10mL/（kg·d）蒸馏水灌胃。给药12周后，注射2%戊巴比妥钠麻醉后取主动脉血，颈椎脱臼法处死大鼠后取左右股骨组织。采用微型计算机断层扫描分析大鼠股骨骨微细结构，包括骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量、骨小梁间隔；采用ELISA法检测血清Ⅰ型前胶原N端前肽（PINP）、抗酒石酸酸性磷酸酶5b、雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）水平；采用Westernblot法检测大鼠股骨组织中信号传导和转录激活因子3（STAT3）、Janus激酶（JAK）、蛋白激酶B（Akt）蛋白表达。结果结合网络药理学分析益癸方汤中可能含有槲皮素、木犀草素、丹参酮、柚皮素、谷甾醇等活性成分。核心靶点包括丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）3、Akt1、TNF等，涉及MAPK、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/Akt等信号通路。动物实验结果显示，与模型组比较，益癸方汤组、戊酸雌二醇组、益癸方汤+戊酸雌二醇组大鼠股骨组织BV/TV、Tb.Th升高，血清中PINP、E2水平升高，FSH水平降低，STAT3、JAK、Akt蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论益癸方汤可能通过下调PI3K/Akt、JAK/STAT信号通路调控炎症、细胞凋亡等防治绝经后骨质疏松症。 |
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| DOI：10.12056/j.issn.1006-2785.2024.46.7.2023-2380 |
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| 基金项目:浙江省中医药现代化专项项目（2021ZX013） |
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