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| 目的 探讨长链非编码 RNA（lncRNA）核旁斑组装转录本 1（NEAT1）靶向微小 RNA（miR）-379-3p 基因调控自噬
在肺腺癌培美曲塞（PEM）化疗耐药性中的作用机制。 方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测 lncRNA NEAT1 与 miR-379-
3p 在肺腺癌细胞中的表达水平；建立两个 PEM 耐药的肺腺癌细胞 A549/PEM 和 NCI-H1299/PEM，构建干扰 lncRNA NEAT1 表达
的 shRNA（shNEAT1）和 miR-379-3p 抑制剂并转染入 A549/PEM 和 NCI-H1299/PEM 细胞中；采用细胞计数试剂盒 8 和克隆形成
实验检细胞活力和增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡率；蛋白质免疫印迹和免疫荧光检测细胞自噬情况，双荧光素酶报告基因
实验验证lncRNA NEAT1与miR-379-3p的靶向结合关系。 结果 与正常支气管上皮细胞16HBE比较，lncRNA NEAT1在肺腺癌
细胞表达水平显著升高，miR-379-3p在肺腺癌细胞中的表达水平显著降低，在耐药肺腺癌细胞中lncRNA NEAT1表达水平进一步
增加，miR-379-3p表达水平进一步降低。耐药肺腺癌细胞加入自噬抑制剂后，细胞自噬和凋亡降低，细胞活力增加。加入自噬激动
剂后，细胞自噬和凋亡增加，细胞活力降低。A549/PEM和NCI-H1299/PEM转染shNEAT1后，细胞活力与增殖能力降低，自噬蛋白
微管相关蛋白 1 轻链 3Ⅱ/Ⅰ和自噬效应蛋白 Beclin-1 的表达显著增加，p62 表达显著降低。NEAT1 可与 miR-379-3p 结合，降低
miR-379-3p的表达。在A549/PEM和NCI-H1299/PEM细胞中转染miR-379-3p抑制剂，可逆转shNEAT1引起的自噬蛋白的表
达，同时可逆转 shNEAT1 对细胞活力与增殖能力的抑制。当加入哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）激动剂时，进一步逆转了 shNEAT1对细胞自噬、细胞活力和增殖能力的影响。 结论 lncRNA NEAT1可靶向miR-379-3p调控mTOR信号通路抑制肺腺癌细
胞自噬从而提高其对PEM的耐药，该机制可为将来针对肺腺癌的靶向治疗提供理论基础。 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划面上项目（2020KY322）；绍兴市卫生健康科技计划项目（2022KY006）；绍兴市基础公益类计
划项目（2023A14006） |
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