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| 目的 探讨脂肪干细胞（ADSCs）外泌体（Exo）（ADSCs-Exo）通过高表达血管生成素-1（Ang-1）对急性肺损伤
（ALI）的治疗机制。 方法 体外培养 ADSCs 并收集 Exo，透射电子显微镜、蛋白质印迹（Western blot）和纳米颗粒跟踪分析技术
对Exo进行鉴定。使用10 μg/mL 脂多糖（LPS）处理肺微血管内皮细胞（PMVECs）12 h，构建ALI体外细胞模型。在使用LPS的基
础上，根据 ADSCs-Exo 中转染过表达 Ang-1（oe-Ang-1）质粒或过表达阴性对照（oe-NC）质粒，将细胞分为：（1）对照（Control）
组和 LPS 组；（2）LPS+oe-NC-Exo 组和 LPS+oe-Ang-1-Exo 组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot 法检测细胞
Ang-1 蛋白表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β 和 IL-6 水平。使用
5 mg/kg LPS 构建体内 ALI 模型，并采用随机数字表法将 30 只大鼠分为假手术（sham）组、ALI 组、ALI+Exo 组、ALI+oe-NC-Exo
组和 ALI+oe-Ang-1-Exo 组，每组 6 只。采用苏木素-伊红染色观察大鼠肺组织病理学变化，Western blot 法检测大鼠肺组织
Ang-1 蛋白表达水平，ELISA 法检测大鼠血清 TNF-α、IL-1β 和 IL-6 水平。 结果 ADSCs-Exo 粒径约 100 nm，且 ADSCs-Exo
能够被 PMVECs 摄取。与 Control 组比较，LPS 组细胞凋亡率升高，Ang-1 蛋白表达水平降低，TNF-α、IL-1β 和 IL-6 水平均升高
（均 P＜0.01）。与 LPS+oe-NC-Exo 组比较，LPS+oe-Ang-1-Exo 组细胞凋亡率降低，Ang-1 蛋白表达水平升高，TNF-α、IL-1β
和IL-6水平均降低（均P＜0.05）。与sham组比较，ALI组大鼠肺组织结构破坏严重；与ALI组比较，ALI+Exo组大鼠肺组织损伤有
所减轻；与 ALI+oe-NC-Exo 组比较，ALI+oe-Ang-1-Exo 组肺组织损伤显著减轻。与 sham 组比较，ALI 组大鼠肺组织 Ang-1 蛋
白表达水平降低，血清 TNF-α、IL-1β 和 IL-6 水平均升高（均 P＜0.05）；与 ALI 组比较，ALI+Exo 组大鼠肺组织 Ang-1 蛋白表达水
平升高，血清 TNF-α、IL-1β 和 IL-6 水平均降低（均 P＜0.05）；与 ALI+oe-NC-Exo 组比较，ALI+oe-Ang-1-Exo 组大鼠肺组织
Ang-1蛋白表达水平升高，血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均降低（均P＜0.05）。 结论 在ADSCs-Exo 中过表达Ang-1可抑制
PMVECs中炎症因子水平和降低细胞凋亡率，从而减轻ALI。 |
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| 基金项目:浙江省基础公益研究计划项目（LGF22H150020、LGF21H150001） |
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