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Kisspeptin对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞凋亡和自噬的影响及机制研究
石明晴 王津 徐小雨 蓝关翠1,2
1.丽水市中医院妇产科;2.浙江中医药大学第三临床医学院
摘要:
目的 分析 Kiss-1基因表达物 Kisspeptin(Kp)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞分泌、增殖、凋亡和 自噬的影响,探讨 Kp 对 PCOS 大鼠卵巢颗粒细胞凋亡和自噬的调控机制 。 方法 采用来曲唑灌胃构建 PCOS 大鼠模型,分离并 培养 PCOS 大鼠卵巢颗粒细胞,并将细胞分为 Kp 高、中、低剂量组和模型组,将正常大鼠卵巢颗粒细胞设为正常对照组,共 5 组。 向 Kp 高、中、低剂量组分别加入浓度 1 000、100、10 nmol/L 的 Kp-10 培养液 。经过 24、48、72 h 的细胞培养后,采用细胞计数试 剂盒 8 法观察细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验检测细胞分泌功能,实时聚合酶链反应检测细胞培养 72 h 后凋亡因子[肿瘤蛋白 53(p53)、细胞色素 C(CytC)]、自噬因子[p62 蛋白(p62)、Beclin1 蛋白(Beclin1)] mRNA 的表达水平 。 结果 与正常对照组比 较,模型组大鼠卵巢组织形态发生变化,血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)水平降低,血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平升高, 细胞增殖能力下降,细胞分泌孕酮(P)、E2 水平下降,p53、CytC、Beclin1 mRNA 表达水平升高,p62 mRNA 表达水平降低,差异均 有统计学意义(均P<0.05)。 与模型组比较,卵巢颗粒细胞培养 48 h 后 Kp 高、中剂量组细胞增殖能力均上升,培养 72 h 后 Kp 高、 中、低剂量组细胞增殖能力上升,Kp 高、中、低剂量组分泌 P 水平升高,p53、CytC、Beclin1 mRNA 表达水平降低,p62 mRNA 表达 水平升高,Kp 高剂量组分泌 E2 水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。 与 Kp 低剂量组比较,培养 48、72 h 后 Kp 高、中剂量 组细胞增殖能力升高,Kp 高、中剂量组分泌 P、E2 水平升高,p53、CytC mRNA 表达水平降低,p62 mRNA 表达水平升高,差异均有 统计学意义(均P<0.05)。 与 Kp 中剂量组比较,培养 48、72 h 后 Kp 高剂量组细胞增殖能力升高,Kp 高剂量组分泌 P 水平升高, Beclin1 mRNA 表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。 结论 Kp 可促进 PCOS 大鼠卵巢颗粒细胞增殖及分泌,并且 可降低 PCOS 大鼠颗粒细胞中凋亡和自噬因子的表达。
关键词:  
DOI:
分类号:
基金项目:浙江省中医药科学研究基金项目(2021ZB338);浙江省卫生健康科技计划项目(2021RC147)
Abstract:
Key words: