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| 目的 探讨乳酸片球菌(PA)对大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)肠损伤的保护作用。 方法 将36只2日龄SD大鼠随机
分为对照组、NEC组、PA干预组。NEC组和PA干预组采用配方奶喂养联合缺氧冷刺激构建NEC模型,PA干预组喂养时加入PA,剂
量为5×107 CFU/(g·d);实验期间每天观察并记录各组新生大鼠的体重情况和存活数量;出生后第5天用异氟烷麻醉后处死大鼠,取
回肠组织进行形态分析与病理评分。采用RT-qPCR法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达水平,
蛋白质印迹法检测Toll样受体4(TLR4)蛋白相对表达水平,免疫荧光染色检测细胞增殖标志物(Ki-67)表达情况,采用末端脱氧核苷
酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色评估回肠组织细胞凋亡情况。采用组织免疫荧光染色检测紧密连接蛋白[闭锁小带蛋白1
(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)]平均荧光强度,评估肠道屏障完整性。 结果 与对照组比较,NEC组大鼠第5天存活率明显下降,回
肠组织病理评分升高,肠黏膜绒毛高度及隐窝深度均降低,TNF-α、IL-6 mRNA及TLR4蛋白相对表达水平均明显升高,Ki-67平均阳
性细胞数减少,细胞凋亡程度增加,回肠组织破坏严重,以及 ZO-1、Occludin 平均荧光强度均降低,差异均有统计学意义(均 P<
0.05)。经PA干预后,大鼠第5天存活率升高,回肠组织病理评分降低,肠黏膜绒毛高度及隐窝深度均回升,TNF-α、IL-6 mRNA及
TLR4蛋白相对表达水平均降低,Ki-67平均阳性细胞数增加,细胞凋亡减少,ZO-1、Occludin平均荧光强度明显回升,差异均有统计
学意义(均P<0.05)。 结论 PA干预可减轻新生大鼠NEC所致的回肠组织损伤,减轻肠道炎症反应,促进肠黏膜上皮细胞增殖,减
少细胞凋亡,上调紧密连接蛋白表达,从而对NEC肠损伤发挥保护作用。 |
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| 基金项目:国家重点研发计划项目(2023YFC2706400) |
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