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| 目的 探讨自体富血小板血浆(PRP)治疗单纯性肛瘘的效果及作用机制。 方法 取体重约30 kg的健康雄性长白
猪 6 只,采用弹性结扎法建立肛瘘模型,按随机数字表法分为 PRP 组(填塞 PRP 凝胶)和对照组(仅常规清创缝合),每组 3 只。利
用 B 超检查瘘管愈合情况;第 7 天切取瘘管外口组织,分别采用 qRT-PCR、蛋白质印迹法检测瘘管外口组织血管内皮生长因子
(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA 和蛋白表达以及丝裂原活化蛋白激酶(MEK)1/2/磷酸化 MEK(p-MEK)1/2、细胞外
信号调节激酶(ERK)1/2/磷酸化 ERK(p-ERK)1/2,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记染色法检测瘘管外口组织细
胞凋亡率。取人皮肤成纤维细胞(HSF)并分为对照组[10%胎牛血清(FBS)]、20%PRP 组(10%FBS+20%PRP)、20%PRP+小干扰
RNA(siRNA)控制(control)组、20%PRP+siRNA ERK(干扰ERK信号通路)组,每组设5个复孔;分别采用细胞划痕实验、细胞计数
试剂盒-8 实验检测 PRP 对 HSF 迁移能力和细胞活力的影响。 结果 PRP 组、对照组实验猪瘘管均愈合,PRP 组愈合时间明显短
于对照组(P<0.001)。PRP 组瘘管外口组织 VEGF、TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平分以及 p-MEK1/2/MEK1/2、p-ERK1/2/
ERK1/2均明显高于对照组(均P<0.05),细胞凋亡率明显低于对照组(P=0.001)。20%PRP组、20%PRP+siRNA control组HSF迁
移率和存活率均较对照组明显升高(均P<0.05),且20%PRP+siRNA control组HSF迁移率和存活率均高于20%PRP+siRNA ERK
组(均P<0.05)。 结论 PRP能增加瘘管外口组织VEGF和TGF-β1表达,抑制细胞凋亡,促进瘘管愈合,可能与增强ERK信号通
路进而促进细胞迁移和提高细胞活性有关。 |
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| 基金项目:浙江省中医药科技计划项目(2024ZL734);杭州市医药卫生科技计划项目(A20210250) |
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