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| 目的 探讨 ALKB 同源物 5（ALKBH5）靶向调控肌联蛋白（Titin）基因表达，并介导无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整
合位点家族蛋白（Wnt）/β-连锁蛋白（β-catenin）信号通路参与宫颈癌生物学行为的相关机制。 方法 回顾性选取 2022 年 10
月至 2023 年 10 月经金华市中心医院病理诊断为宫颈良性肿瘤、上皮不典型增生以及浸润性癌患者各 30 例并收集其手术切除
获取的新鲜宫颈组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测 ALKBH5 和 Titin mRNA 表达水平。体外选择宫颈癌细
胞株 Hela 并分为 5 组，即正常对照（NC）组、ALKBH5-小干扰 RNA（siRNA）组、ALKBH5-NC 组、ALKBH5-siRNA+Titin-模拟物
（mimic）组和 ALKBH5-siRNA+Titin-NC 组；连续培养 72 h，分别采用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术、划痕实验、Transwell 法检
测细胞增殖率、凋亡率、迁移率以及侵袭细胞数，蛋白质印迹法检测上皮间质转化相关蛋白波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白
（N-cadherin）和 E-钙黏蛋白（E-cadherin）以及 Wnt、β-catenin 蛋白表达水平，qRT-PCR 检测细胞 ALKBH5 和 Titin mRNA 表
达水平。采用荧光素酶法检测 ALKBH5 与 Titin 基因的靶向作用。 结果 与宫颈良性肿瘤组织、上皮不典型增生组织相比，浸
润性癌组织中 ALKBH5 和 Titin mRNA 表达水平均明显升高（均 P＜0.01）。与 NC 组、ALKBH5-NC 组相比，ALKBH5-siRNA
组细胞增殖率、迁移率均下降（均 P＜0.05），侵袭细胞数均减少（均 P＜0.05），凋亡率均升高（均 P＜0.05），E-cadherin
蛋白表达水平均上调（均 P＜0.05），Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin 蛋白表达水平以及 ALKBH5、Titin mRNA 表达水平均
下调（均 P＜0.05）；与 ALKBH5-siRNA 组 、ALKBH5-siRNA+Titin-NC 组 相 比 ，ALKBH5-siRNA+Titin-mimic 组 细 胞 增 殖 率 、
迁 移 率 均 升 高（均 P＜0.05），侵袭细胞数均增加（均 P＜0.05），凋亡率均下降（均 P＜0.05），E-cadherin 蛋白表达水平均下
调（均 P＜0.05），Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin 蛋白表达水平以及 Titin mRNA 表达水平均上调（均 P＜0.05）。荧
光素酶报告显示了 ALKBH5 与 Titin 基因的靶向作用位点（225-231 位点），并且 ALKBH5 与 Titin-野生型的相对荧光强度
高于 Titin-突变型（P＜0.001）。 结论 ALKBH5 能靶向上调 Titin 基因表达，并激活 Wnt/β-catenin 信号通路促进宫颈癌的发生
以及恶性肿瘤生物学行为。 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目（2021KY1184）；金华市科技计划项目（2023-3-149） |
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