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| 目的 探讨Notch2通过Wnt/β-连环蛋白信号通路影响急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌细胞损伤的分子机制。 方法
16只Wistar大鼠按随机数字表法分为AMI组和假手术组，每组8只。AMI组大鼠接受气管插管，用左前降支结扎法构建AMI模型。使
用2,3,5-氯化三苯基四氮唑法观察大鼠心肌组织缺血情况；使用苏木精-伊红染色观察大鼠心肌组织形态；使用蛋白质印迹法检测大
鼠心肌组织中Notch2、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、磷酸化PKM2（p-PKM2）、Wnt家族成员3a（Wnt3a）和β-连环蛋白表达量。从新生
Wistar 大鼠心肌组织中分离大鼠心肌细胞，随机分为5组：氧糖剥夺（OGD）组、OGD+sh-NC 组、OGD+sh-Notch2组、OGD+shNotch2+SKL2001组和对照组。OGD组大鼠心肌细胞使用无葡萄糖DMEM以及缺氧（94% N2、5% CO2和1%O2）环境孵育，以构建
OGD模型。OGD+sh-NC组大鼠心肌细胞使用Lipofectamine 3000转染对照物sh-NC，再进行OGD处理。OGD+sh-Notch2组大
鼠心肌细胞转染 sh-Notch2 后进行 OGD 处理。OGD+sh-Notch2+SKL2001 组大鼠心肌细胞转染 sh-Notch2 后使用 20 μmol/L
SKL2001 处理24 h，随后进行OGD处理。对照组大鼠心肌细胞不作处理。使用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测大鼠心肌细胞活
性。使用流式细胞术检测大鼠心肌细胞凋亡率。使用蛋白质免疫印迹法检测大鼠心肌细胞Notch2、p-PKM2、Wnt3a和β-连环蛋白
表达量。 结果 AMI组大鼠较假手术组发生了明显的心肌缺血和心肌损伤，心肌组织中Notch2、Wnt3a、β-连环蛋白表达量高于假
手术组（均P＜0.05），PKM2、p-PKM2蛋白表达量低于假手术组（均P＜0.05）。OGD组大鼠心肌细胞活性低于对照组，凋亡率高于
对照组，Notch2、Wnt3a、β-连环蛋白表达量高于对照组，PKM2、p-PKM2蛋白表达量低于对照组（均P＜0.05）。OGD+sh-Notch2
组大鼠心肌细胞活性高于OGD+sh-NC组，凋亡率低于OGD+sh-NC组，Notch2、Wnt3a、β-连环蛋白表达量低于OGD+sh-NC组，
PKM2、p-PKM2蛋白表达量高于OGD+sh-NC组（均P＜0.05）。OGD+sh-Notch2+SKL2001组大鼠心肌细胞活性低于OGD+shNotch2组，凋亡率高于OGD+sh-Notch2组，PKM2、p-PKM2蛋白表达量低于OGD+sh-Notch2组，Wnt3a、β-连环蛋白表达量高于
OGD+sh-Notch2组（均P＜0.05）。 结论 Notch2可能通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路抑制大鼠心肌细胞糖酵解、降低大鼠心
肌细胞活性，最终促进AMI恶性进展。 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目（2024KY208） |
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